Os fatores que afetam a resolução de uma coluna cromatográfica são o tipo e as propriedades da fase estacionária (tamanho de partícula, distribuição de tamanho de partícula, etc.), condições de empacotamento, comprimento da coluna, tipo e vazão da fase móvel e as propriedades de as substâncias usadas para medir a eficiência da coluna. detalhes da seguinte forma:
(1) O comprimento cromatográfico e as propriedades do enchimento, quanto maior a coluna cromatográfica, melhor a análise entre os componentes, mas quanto maior a coluna cromatográfica, maior a queda de pressão e a pressão de entrada é limitada. Se a coluna for muito longa, a razão de pressão de entrada e saída aumentará, o que afetará a separação dos picos cromatográficos;
(2) O tamanho das partículas do empacotamento da coluna cromatográfica também é o fator principal. Quanto mais finas as partículas, melhor a resolução devido ao aumento da área superficial, mas as partículas mais finas aumentarão a queda de pressão da coluna, o que também terá um efeito adverso;
(3) A temperatura da coluna também tem grande influência na análise do cromatógrafo líquido, pois a solubilidade do gás no líquido ou o grau de adsorção na superfície do sólido diminui com o aumento da temperatura. Na análise cromatográfica líquida a gás -, quando a temperatura excede uma determinada temperatura, os líquidos estáticos geralmente evaporam da coluna, portanto, o ponto de ebulição da amostra deve ser considerado ao escolher a temperatura da coluna. Geralmente, é ligeiramente inferior ao valor médio do ponto de ebulição da amostra;
(4) A influência do tipo de gás de arraste do cromatógrafo gasoso. Os gases de arraste comumente usados são N2, H2, He, Ar, etc. Entre eles, o peso molecular do gás H2 e He é pequeno, o que é propício para melhorar a velocidade de análise, mas o meio com maior concentração é fácil de formar difusão nele, o que afeta o grau de separação, portanto, na medição real, os gases H2 e He são geralmente usados em áreas com baixa concentração do meio e aumentam sua taxa de fluxo para reduzir a influência da difusão. As vantagens de gases com maiores pesos moleculares como N2 e Ar são que o efeito de difusão é pequeno, e a desvantagem é que a queda de pressão na coluna é grande e a vazão é lenta, ou seja, o período de análise é longo;
(5) Influência da vazão do gás de arraste. O tempo de residência do meio na fase estacionária depende principalmente das características do próprio meio (volatilidade, polaridade, etc.) e da vazão do gás de arraste. Portanto, a velocidade da vazão afeta diretamente o grau de separação;
(6) A influência do tempo de injeção e volume de injeção. O tempo de injeção deve ser o mais curto possível. Em princípio, a injeção instantânea melhorará a resolução. O volume de injeção deve ser o menor possível, mas deve ser identificável pelo detector.
Portanto, a melhoria da resolução da coluna cromatográfica pode ser alcançada aumentando o comprimento da coluna, reduzindo o volume de injeção, reduzindo a vazão do gás de arraste, diminuindo a temperatura da coluna cromatográfica, aumentando a temperatura da câmara de vaporização e reduzindo o volume morto do sistema.